主要條款：本標(biāo)準(zhǔn)的章節(jié)由范圍、試劑與材料、主要儀器、測(cè)定步驟、結(jié)果計(jì)算、精密度以及檢出限、方法不確定度組成

本標(biāo)準(zhǔn)中主要技術(shù)參數(shù)、試驗(yàn)驗(yàn)證參數(shù)如下：1、主要技術(shù)參數(shù)的確認(rèn)1.1色譜柱的選擇實(shí)驗(yàn)選取了兩根不同型號(hào)的色譜柱，兩種型號(hào)的色譜柱分別為HSST3和BEHC18色譜柱，通過(guò)使用單因子變量法，最終確定BEHC18色譜柱分離較好，能夠?qū)ⅵ?亞麻酸和L-苯基乳酸完全分離

色譜圖如圖1所示圖1所示為：標(biāo)準(zhǔn)樣品的色譜圖1.2流動(dòng)相的選擇實(shí)驗(yàn)對(duì)流動(dòng)相的選擇首先選定水-甲醇、乙酸-甲醇，水-乙腈，甲醇-磷酸等進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，通過(guò)實(shí)驗(yàn)后，均發(fā)現(xiàn)效果較差，不能夠很好的實(shí)現(xiàn)分離

發(fā)現(xiàn)使用低濃度的磷酸對(duì)兩種物質(zhì)的分離會(huì)起到很大的作用，配制1%、0.5%以及0.1%的磷酸溶液作為流動(dòng)相分別進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，使用0.1%的磷酸分離較好，而且峰形較好，滿足使用要求，故實(shí)驗(yàn)選擇0.1%的磷酸作為流動(dòng)相進(jìn)行α-亞麻酸和L-苯基乳酸的分離

1.3波長(zhǎng)的選擇通過(guò)查找文獻(xiàn)并進(jìn)行試驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)階段對(duì)本次實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了系統(tǒng)歸納與總結(jié)，通過(guò)使用210-500nm的波長(zhǎng)段掃描，得到相應(yīng)的3D掃描圖，經(jīng)過(guò)后期的提取色譜圖和文獻(xiàn)報(bào)道，確定最佳檢測(cè)波長(zhǎng)205nm

標(biāo)樣驗(yàn)證進(jìn)行相應(yīng)的波長(zhǎng)驗(yàn)證

2、試驗(yàn)驗(yàn)證各項(xiàng)技術(shù)參數(shù)確定后，標(biāo)準(zhǔn)制定小組通過(guò)精密度、重現(xiàn)性、穩(wěn)定性和回收率試驗(yàn)驗(yàn)證效果，獲得的平行測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD%均小于5，其精密度符合方法學(xué)的要求；并進(jìn)行了異地驗(yàn)證試驗(yàn)及方法不確定度的計(jì)算，提高了本方法規(guī)范性、統(tǒng)一性和科學(xué)性

2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立準(zhǔn)確吸取α-亞麻酸和L-苯基乳酸混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別配制5個(gè)濃度的溶液（α-亞麻酸標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度：20mg/L、40mg/L、80mg/L、160mg/L、400mg/L；L-苯基乳酸標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度：25mg/L、50mg/L、100mg/L、200mg/L、500mg/L）

測(cè)定5個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)混合工作液，以濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；R2=0.998，線性良好

2.2精密度對(duì)同一白酒樣品，按照樣品制備方法平行制備6份樣品，并用本方法進(jìn)行α-亞麻酸和L-苯基乳酸檢測(cè)（其中一個(gè)樣品重復(fù)進(jìn)樣6次），所得重復(fù)性和重現(xiàn)性檢測(cè)結(jié)果如表1和表2所示表1α-亞麻酸和L-苯基乳酸重復(fù)性檢測(cè)結(jié)果項(xiàng)目　　次數(shù)　1　2　3　4　5　6　RSDL-苯基乳酸　44.1　44.57　44.73　44.96　44.84　45.08　2.20%α-亞麻酸　50.53　49.74　50.47　50.96　50.52　51.39　1.10%由表1知，六次重復(fù)測(cè)定結(jié)果的RSD為2.20%和1.08%，方法重復(fù)性良好

表2α-亞麻酸和L-苯基乳酸重現(xiàn)性檢測(cè)結(jié)果項(xiàng)目　　次數(shù)　1　2　3　4　5　6　RSDL-苯基乳酸　415.32　398.10　401.26　450.22　438.30　387.62　4.92%α-亞麻酸　399.62　396.24　402.64　401.28　404.64　403.16　7.46%由上表2知，重現(xiàn)性測(cè)定結(jié)果的RSD=4.92%和7.46%，重現(xiàn)性良好

2.3加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)取3個(gè)已知α-亞麻酸和L-苯基乳酸含量分別為：48.62mg/L和15.45mg/L的樣品，使用已知濃度的α-亞麻酸和L-苯基乳酸標(biāo)準(zhǔn)品配制三個(gè)濃度水平的樣品，按照標(biāo)準(zhǔn)所述方法處理檢測(cè)，計(jì)算回收率均在80%-120%之內(nèi)，具體如下表3所示

表3酒樣中α-亞麻酸和L-苯基乳酸的加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果加標(biāo)物　底物濃度（mg/L)　加標(biāo)水平（mg/L）　　40　100　400　　實(shí)測(cè)值　回收率　實(shí)測(cè)值　回收率　實(shí)測(cè)值　回收率L-苯基乳酸　15.45　47.95　81.25%　112.85　97.40%　346.07　82.66%α-亞麻酸　48.62　85.12　91.25%　145.92　97.30%　415.14　91.63%2.4方法的檢出限與定量限對(duì)本方法作如下靈敏度測(cè)試：靈敏度測(cè)試包括儀器的靈敏度與方法的靈敏度，儀器的靈敏度用儀器的檢出限表示，取信噪比≥3的L-苯基乳酸和α-亞麻酸的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的最小濃度為儀器檢出限；方法的靈敏度用方法的定量限表示，取信噪比≥9的L-苯基乳酸和為α-亞麻酸混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的最小濃度為方法定量限

所得的相關(guān)數(shù)據(jù)見(jiàn)表4

表4酒樣中α-亞麻酸和L-苯基乳酸的定量限和檢出限的數(shù)據(jù)名稱　檢出限mg/L　定量限mg/LL-苯基乳酸　1.00　5.00α-亞麻酸　1.00　5.002.5異地驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)本方法已與安徽國(guó)科檢測(cè)科技有限公司液相液質(zhì)室進(jìn)行了異地實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證，結(jié)果如下表5

表5酒樣中α-亞麻酸和L-苯基乳酸異地實(shí)驗(yàn)室比對(duì)結(jié)果

地方標(biāo)準(zhǔn)《亞麻品種選育 亞麻籽中α-亞麻酸含量的測(cè)定 高效液相色譜法》，主管部門為內(nèi)蒙古自治區(qū)質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局。

行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《生物柴油中脂肪酸甲酯及亞麻酸甲酯含量的測(cè)定 氣相色譜法》由全國(guó)石油產(chǎn)品和潤(rùn)滑劑標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口上報(bào)，主管部門為國(guó)家能源局。1．1本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了測(cè)定用作純生物燃料或作為柴油燃料調(diào)合組分的生物柴油中脂肪酸甲酯(FAME)含量以及其中所含亞麻酸甲酯含量的方法。1．2本標(biāo)準(zhǔn)用于測(cè)定質(zhì)量分?jǐn)?shù)大于90％的脂肪酸甲酯的總含量，亞麻酸甲酯質(zhì)量分?jǐn)?shù)的測(cè)定范圍為1％～15％。1．3本標(biāo)準(zhǔn)適用于測(cè)定C至C的脂肪酸甲酯的含量。

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了保健食品中α-亞麻酸、二十碳五烯酸（簡(jiǎn)稱EPA,下同）、二十二碳五烯酸（簡(jiǎn)稱DPA，下同）和二十二碳六烯酸（簡(jiǎn)稱DHA,下同）的氣相色譜測(cè)定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于保健食品中α-亞麻酸、EPA、DPA、DHA的測(cè)定，不適用于以脂肪酸乙酯為有效成分的保健食品中α-亞麻酸、EPA、DPA、DHA的測(cè)定。